杭州交通信息网qq情侣霸气头像:为什么形成包涵体？
来源：百度文库 编辑：杭州交通信息网 时间：2024/04/30 06:54:12
我做了两个蛋白，都是用GST做的融合，大小只有60Kd左右（融合后），为什么都形成了包涵体？我用了四个宿主，都是一样，难道只有换载体才行？
形成包涵体的原因究竟是什么？ 老板让我在培养基中加还原剂试试，各位说行不行？
形成包涵体的原因究竟是什么？ 老板让我在培养基中加还原剂试试，各位说行不行？
经验上来说，表达蛋白的时候由于表达量在短时间之内大量聚集会形成包涵体，或者你的蛋白本身不溶，而表达时又没有加上助溶的tag, 也会形成包涵体
首先预测你的蛋白本身性质如何，然后再考虑表达方法
你用的是E还是昆虫细胞为宿主菌？
如果是E，建议你尝试降低诱导温度，延长诱导时间
比如原来用37度诱导，现在用30度或者28度，诱导过夜
这样在一定程度上会减少包涵体的形成
如果还不行，也可以尝试换个载体，带增溶tag 的，也比较有效
60kd的蛋白不太难做的
如果你需要详细的资料，可以mail我
keyin@sibs.ac.cn
祝你成功