澳大利亚和俄罗斯关系:锗对人体有什么好处坏处

来源:百度文库 编辑:杭州交通信息网 时间:2024/04/29 13:34:40
我想知道它的在医药领域的作用

锗元素能夺取癌细胞电位,,
目前锗盐、锗粉比较畅销,淘宝价35和25 (每五克价)

锗的特性 镓 - 锗 - 砷




Image:Ge-TableImage.png
元素周期表

总体特性
名称, 符号, 序号 锗、Ge、32
系列 类金属
族, 周期, 元素分区 14族(IVA), 4, p
密度、硬度 5323 kg/m3、6
颜色和外表 灰白色
Image:Ge,32.jpg
地壳含量 6×10-4%
原子属性
原子量 72.64 原子量单位
原子半径(计算值) 125(125)pm
共价半径 122 pm
范德华半径 无数据
价电子排布 [氩]3d104s24p2
电子在每能级的排布 2,8,18,4
氧化价(氧化物) 4(两性的)
晶体结构 面心立方
物理属性
物质状态 固态
熔点 1211.4 K(938 °C)
沸点 3093 K(2820 °C)
摩尔体积 13.63×10-6m3/mol
汽化热 330.9 kJ/mol
熔化热 36.94 kJ/mol
蒸气压 0.0000746 帕(1210K)
声速 5400 m/s(293.15K)
其他性质
电负性 2.01(鲍林标度)
比热 320 J/(kg·K)
电导率 1.45 /(米欧姆)
热导率 59.9 W/(m·K)
第一电离能 762 kJ/mol
第二电离能 1537.5 kJ/mol
第三电离能 3302.1 kJ/mol
第四电离能 4411 kJ/mol
第五电离能 9020 kJ/mol
最稳定的同位素
同位素 丰度 半衰期 衰变模式 衰变能量
MeV 衰变产物
70Ge 21.23 % 稳定
72Ge 27.66 % 稳定
73Ge 7.73 % 稳定
74Ge 35.94 % 稳定

摘要 自行筛选的金针菇(Flammulina veludipes),将有机锗(Ge-132)作为外加锗源经发酵培养,有机锗(Ge-132)中的锗与金针菇内的多糖结合,经DEAE-Sephadex A-25和Sephadex G-200分离纯化,得金菇金糖锗。再经聚丙烯酰胺电泳,超速离心鉴定,为均一体。元素分析:C 37.1%,H6.58%,N<0.2%,Ge 120 ug/g,,比旋度+58.4,分子量35000~40000。单糖组成:葡萄糖、阿拉伯糖、木糖。经分析金针菇箘丝体内锗与多糖的结合率为80.5%,锗与蛋白质结合率为1.8%。药理实验表明,2.5%金菇多糖锗水溶液,对艾滋病病毒逆转录酶的抑制率为100%。

关键词 金针菇;金菇多糖锗;艾滋病病毒逆转录酶

香菇、金针菇的药用效果已众所周知。有机锗化合物具有较好的抗癌、抗衰老、增加机体免疫功能等活性,因而得到迅速的开发利用。其来源主要为化学合成和生物转化,前者往往有一定的难度而且产品价格昂贵,后者较易控制,成本低,高效低毒,故锗的生物转化显得更有意义。据报道,日本学者在培养基中添加二氧化锗,使锗成分被菌丝体同化吸收。这时就可以从菌丝中提取更有效的药用成分提取液。经过添加二氧化锗的菌丝体提取液,含锗浓度为92×10-6,并以多糖和锗盐的状态存在。而不加二氧化锗培养的菌丝体,其提取液含锗为1×10-6~3×10-6。前者提取液具有更强的降血压,去降胆固醇和抗癌效果。其原因是锗元素或无机锗对人体有毒、无活性,如要得到具有活性的锗化合物,就必须使锗有机化。本研究是将具有生理功能的锗元素,采用生物工程技术,引入金针菇菌体,与金针菇的多糖结合,形成具有强烈抑制艾滋病病毒逆转录酶活性的生物锗,并将它分离纯化,测定理化特性、锗与多糖的结合率等。

1 材料与仪器
1.1材料
菌种为自行筛选培养的金针菇(Flammulina veludipes),Ge-132由南京锗厂提供,金菇金糖锗为自行提取纯化并用灭菌去离子水配制成5%的水溶液。
胰蛋白酶为上海华美生物工程公司提供,艾滋病病毒逆转录酶由全国发病麻风病控制中心提供。DEAE-Sephadex A-25,DEAE-Sephadex G-100,DEAE-Sephadex G-200,美国Sigma公司,DE-52美国Sigma公司。单糖标准品为上海试剂厂产品,其他试剂为国产A.R试剂。
1.2 仪器设备
BSI自动部分收集器,上海沪西仪器厂;全波长分光光度计,日本岛津;冷冻干燥机,美国格尔曼;电感耦合等离子直读光谱仪(ICP)美国;高效液相色谱仪,日本岛津;液闪仪,美国。
2 结果与讨论
2.1金菇多糖锗对艾滋病病毒逆转录酶的抑制作用
以灭菌去离子水配制5%金菇金糖锗溶液和5%Ge-132溶液,分别按1:1,1:5,1:10,1:20,1:50和1:100稀释(体积比)。稀释后的样品与等量艾滋病病毒逆转录酶混合,加入逆转录反应体系,370C水浴45min,取上述反应液50ul点样,洗涤后烘干,液闪计数CPM值并计算抑制百分率。结果见

表1

用本方法获得的金菇多糖锗纯品浓度为25mg/ml时,对艾滋病病毒逆转录酶的抑制率为100%,8.3mg/ml时其抑制率也有60%,但Ge-132浓度为25mg/ml时其抑制率只有8%,实验表明金菇多糖锗对艾滋病病毒逆转录酶具有强烈的抑制作用,而Ge-132抑制作用很弱。
2.2 富锗金针菇菌丝体中多糖锗的分离与纯化。
取定量金针菇菌丝体加水,于900C水溶中搅拌提取2次,每次2h,合并抽提液,薄膜浓缩至粘稠状,离心去除不溶物,加入6倍体积的95%乙醇,离心得到深褐色粗多糖锗制品。
为脱去粗多糖锗中含有的色素,将10%粗多糖锗溶液在500C水浴中保温,调PH至8.5,经H2O处理后,再加入5倍体积的95%乙醇,于冰箱放置过液,次日离心得到淡黄色的金菇多糖锗。
采用Sevag法将脱色的金针多糖锗进行去蛋白处理。在多糖锗水溶液中加入氯仿-正丁醇(5:1)混合剂,振荡30min后,取水相离心去除杂蛋白层,按上法,重复数次,去尽杂蛋白。多糖锗溶液对水透析72h,减压浓缩至粘稠状,加入5倍体积的95%乙醇,离心,沉淀,依次用乙醇、丙酮洗涤后,P2O5真空干燥得到多糖锗半精品。
取上述多糖锗半精品,溶于少量水中。去不溶物后,上DEAE-Sephadex A-25柱(2.5cm×35cm),依次用H2O、0.15mol/L NaCl、0.25mol/L Na-Cl进行阶段洗脱,分部收集,用蒽酮比色法测定各管糖含量,同时用电感耦合等离子直读光谱仪(ICP)测定各管锗的含量,以鉴定多糖锗部位,合并多糖锗部位试管溶液,经透析。浓缩后加入5倍体积的95%乙醇,得到乳白色金针菇多糖锗精制品。
2.3 金针菇多糖锗的分析鉴定
2.3.1 金菇多糖锗的一般性质 多糖锗水溶液经紫外扫描,在紫外区域无特征吸收,不含有蛋白质和核酸。多糖锗在水解前对Fehlin试剂呈阴性反应,当用盐酸水解后,与Fehlin试剂发生反应,产生棕红色沉淀,多糖锗与a-萘酚硫酸试剂反应产生紫红色环,与硫酸-苯酚试剂反应产生桔黄色,将多糖锗的水溶液点在滤纸上用Schiff试剂染色呈红色,用甲苯胺蓝染色呈蓝色,具有一般多糖的性质。
2.3.2 金菇多糖锗的纯度鉴定 采用凝胶柱层析:取样品15mg,上Sephadex G-200柱(2.5cm×30cm),用0.05mol/L NaCl洗脱,流速4~5ml/h,,每管收集2 ml,蒽酮法测定含糖部位,ICP测定锗含量,结果发现为单一峰,其洗脱峰体积在50 ml。
超速离心:金菇多糖锗溶解于0.85mol/L NaCl溶液中,以50000r/min超速离心,结果显示为单一区带。
纸层析:多糖锗水溶液,点样于新华3号滤纸,展开剂为正丙酮-浓氨水-水(40:50:5),室温下上行展开至吹干后以0.5%甲苯胺蓝乙醇溶液染色,95%乙醇漂洗背景,结果为单一斑点。
2.3.3 金菇多糖锗的理化分析 分子量的测定采用超速离心法,根据Schlieren扫描在同一浓度下分别测定每个样品的沉降系数S和扩散系数D,分别为2.9×10-4和6.5×10-8,代入Svedberg方程MW=RTS/D(1-V。),求得金针多糖锗重均分子量为35280。
用240型元素分析仪测定多糖锗的C、H、N含量,分别为37.1%,6.58%,<0.20%。ICP测定Ge的含量为120ug/g,W22自动显示旋光仪测得比旋度,{a}D18=+58.4(0.5,H2O)。
红外光谱(IR)分析:金菇多糖锗以KBr压片,在NICOLFT 170SXFT型红外光谱仪上扫描分析,吸收光谱具有多糖的特征吸收峰,而在890cm-1处无明显吸收,提示分子中不存在B-糖苷键,在820 cm-1与910 cm-1处有小峰为分子中阿拉伯糖组分的特征。核磁共振(1H-NMR)分析:由1H-NMR测得金菇多糖锗化学位移值d为5.13,说明多糖锗分子中的糖苷键为a型。
2.3.4 金菇多糖锗的单糖组成分析 取金菇多糖锗20 mg,加2 mol/L H2SO4在封管下100℃水解5h,Ba(OH)2中和浓缩点样于新华1号滤纸。用正丁醇-冰醋酸-水(8:3:4)为展开剂,苯胺-邻苯二甲酸为显色剂,下行展开,与相应标准品对照,结果发现金菇锗多糖中,多糖的组成为D-葡萄糖,阿拉伯糖和木糖。若以D-葡萄糖的R1值为1,则它们相对的R1值之比为:阿拉伯糖:木糖=1.0:0.38:0.24。
2.3金针菇菌体中锗与多糖的结合率
取外加Ge-132液体发酵培养的金针菇菌丝体,用去离子水反复冲洗,洗至用IPC测定冲洗液中无锗含量为止,此时金菇菌丝体表面无游离锗,再用渗透法检测金针菇菌丝体内无游离锗。将除去游离锗的金针菇菌丝体,用上述方法分离纯化获高纯化的金菇多糖锗。取除去游离锗的金针菇菌丝体100g可分离纯化得3g金菇金糖锗,前者100g菌丝体中锗含量为448.48ug,后者3g金菇多糖锗中锗含量为360 ug,两者之比为100:80.5,即金针菇菌丝体中锗有80.5%与金针菇多糖相结合,结合率为80.5%。用纯化蛋白质方法,按上述方法计算,金针菇中锗与蛋白质结合率为1.8%。关于金菇多糖锗中锗与金针菇多糖的结合形式,分级,分子表征,溶液结构参数正在研究中,光谱数据初步说明金菇多糖可能在0~6位共价键结合锗,研究结果将另文报道。