转让无形资产交增值税:如何提取斑蝥素？

提取斑蝥素步骤：
　　一、原料的处理：用洁净的玻璃瓶研碎，粉碎后的原料放入干燥器中干燥保存；
　　二、实验装置的安装：
　　将2000mL三口烧瓶置于水浴锅上，三口瓶两侧口分别按装温度计和环形冷凝管，安装电动搅拌仪；
　　三、浸泡：
　　将准备好的原料置于三口烧瓶内用10％盐酸稀释液浸泡24小时；
　　四、酸解：
　　打开电动搅拌器匀速搅拌，水浴加热，温度控制80℃左右。反应进行8h；
　　五、冷却萃取：
　　将反应过的原料冷却后加入二氯甲烷，搅拌一小时，布氏漏斗底端垫3纱布，上面放置2层滤纸。加压抽滤，通气管封闭。分别收集滤渣和滤液。抽滤瓶内滤液转移至分液漏斗内，布氏漏斗内滤液回收；
　　六、重复上述步骤两次。
　　七、浓缩：将下层二氯甲烷合并，经减压蒸馏浓缩得到黄褐色粘稠浸膏，馏分保留；
　　八、洗涤：用1＃溶剂（石油醚：乙醇＝1：2）、2＃溶剂（石油醚：乙醇＝2：1）、3＃溶剂（石油醚：乙醚：乙酸＝9：10：1）洗涤沉淀至无色；回收洗液，浓缩，结晶，重新洗涤，重复二次。合并三次沉淀；
　　九、重结晶的纯品：用丙酮重结晶。

斑蝥素的提取
1.取斑蝥5g置于一带塞玻璃瓶中
2.加氯仿50mL及浓盐酸0.5mL，浸取24小时，并对其时加摇振
3.过滤，得澄清黄棕色溶液，置于60℃以下的水浴上吹气蒸发，得深色残渣
4.将上述残渣加石油醚5mL，用离心沉淀法洗三次以除去脂肪、油类杂质
5.所得残渣加2mL无水乙醇溶解，再加12mL石油醚，并加热使之溶解
6.置于冰箱中过夜便会有棱柱状晶体析出

1。称取斑蝥2 g，
2 加入10倍量125 mmol·L 氢氧化钠溶液，
3 将超声波发生器之换能器插入其中提取，
4 提取液滤过，合并滤液，
5 以3 000 r·min 离心10 min，
6 上清液水浴浓缩至20 mL。
7 精密吸取斑蝥素提取液10 mL，
8 盐酸调至pH2，
9 氯仿萃取3次(20，15，15 mL)合并氯仿液，
10 水浴蒸干，
11 残渣丙酮溶解，转移至1 mL量瓶。

用超声波提取斑蝥素的可行性。方法 在稀NaOH溶液中，用800kHz超声波提取斑蝥素45min（30min+15min），比较其与煎煮法90min（60min+30min）提取率的差别。结果 超声法提取斑蝥素克服了煎煮法一些缺点，且并不影响斑蝥素的提取率（P>0.05）。结论 超声提取法优于煎煮提取法。

在稀NaOH溶液中，用800kHz超声波提取斑蝥素45min（30min+15min），比较其与煎煮法90min（60min+30min）提取率的差别。结果 超声法提取斑蝥素克服了煎煮法一些缺点，且并不影响斑蝥素的提取率（P>0.05）。